图书介绍

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微生物生物技术 细菌系统实验指南
  • (印)S.待仕(Surajit Das),(印)H.R.达什(Hirak Ranjan Dash)编;朱必凤译 著
  • 出版社: 北京:科学出版社
  • ISBN:9787030576569
  • 出版时间:2018
  • 标注页数:244页
  • 文件大小:27MB
  • 文件页数:259页
  • 主题词:微生物-生物工程-实验-指南

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图书目录

第1章 细菌分子微生物学基础1

实验1.1 基因组DNA的分离1

导言1

原理1

所需试剂及其作用2

操作步骤3

观察4

结果表格4

疑难问题和解决方案4

注意事项5

操作流程5

实验1.2 细菌裂解物的制备6

导言6

原理7

操作步骤8

观察9

结果表格10

疑难问题和解决方案10

注意事项10

操作流程11

实验1.3 质粒的分离13

导言13

原理14

所需试剂及其作用15

操作步骤16

观察17

结果表格17

疑难问题和解决方案17

注意事项17

操作流程18

实验1.4 细菌总RNA的分离19

导言19

原理19

所需试剂及其作用20

操作步骤21

观察22

结果表格22

疑难问题和解决方案23

注意事项23

操作流程23

实验1.5 16S rRNA基因的扩增24

导言24

原理26

所需试剂及其作用27

操作步骤28

观察30

疑难问题和解决方案30

注意事项30

操作流程31

实验1.6 琼脂糖凝胶电泳31

导言31

原理32

所需试剂及其作用33

操作步骤35

观察36

疑难问题和解决方案37

注意事项37

操作流程37

第2章 克隆与转化39

实验2.1 感受态细胞制备和热激转化39

导言39

原理40

所需试剂及其作用41

操作步骤41

观察43

疑难问题和解决方案43

注意事项43

操作流程44

实验2.2 电穿孔45

导言45

原理46

所需试剂及其作用47

操作步骤48

观察49

结果表格49

疑难问题和解决方案49

注意事项50

操作流程50

实验2.3 限制性内切核酸酶消化和连接51

导言51

原理51

所需试剂及其作用55

操作步骤56

观察57

疑难问题和解决方案58

注意事项58

操作流程58

实验2.4 克隆所需合适载体系统的选择59

导言59

克隆载体的不同类型62

选择合适克隆载体的标准66

结论68

实验2.5 蓝-白斑筛选验证转化69

导言69

原理69

所需试剂及其作用70

操作步骤71

观察72

疑难问题和解决方案72

注意事项73

操作流程73

实验2.6 PCR验证克隆74

导言74

原理74

所需试剂及其作用76

操作步骤77

观察78

疑难问题和解决方案78

注意事项78

操作流程79

第3章 分子微生物学先进技术80

实验3.1 cDNA的合成80

导言80

原理80

所需试剂及其作用82

操作步骤83

观察85

疑难问题和解决方案85

注意事项85

操作流程86

实验3.2 qRT-PCR分析基因表达86

导言86

原理87

所需试剂及其作用89

操作步骤90

疑难问题和解决方案92

注意事项93

操作流程93

实验3.3 用报道基因方法进行基因表达分析93

导言94

原理94

所需试剂及其作用95

操作步骤96

观察97

疑难问题和解决方案97

注意事项97

操作流程97

实验3.4 基因表达半定量分析98

导言98

原理99

所需试剂及其作用100

操作步骤101

观察103

观察表格103

疑难问题和解决方案104

注意事项104

操作流程105

实验3.5 Northern印迹105

导言105

原理106

所需试剂及其作用108

操作步骤109

观察111

疑难问题和解决方案111

注意事项111

操作流程111

实验3.6 宏基因组DNA的分离113

导言113

原理113

所需试剂及其作用115

操作步骤116

观察116

结果表格117

疑难问题和解决方案117

注意事项117

操作流程117

实验3.7 细菌细胞质粒消除118

导言118

原理119

所需试剂及其作用120

操作步骤121

观察121

结果表格121

疑难问题和解决方案121

注意事项121

操作流程122

实验3.8 细菌接合122

导言122

原理123

所需试剂及其作用124

操作步骤125

观察125

结果表格126

疑难问题和解决方案126

注意事项126

操作流程126

实验3.9 细菌转导127

导言127

原理128

所需试剂及其作用129

操作步骤130

观察131

结果表格131

疑难问题和解决方案131

注意事项131

操作流程131

第4章 分子微生物多样性133

实验4.1 质粒图谱分析133

导言133

原理133

所需试剂及其作用134

操作步骤136

观察139

结果表格139

疑难问题和解决方案140

注意事项140

操作流程140

实验4.2 扩增核糖体DNA限制性分析研究细菌相关性142

导言142

原理142

所需试剂及其作用143

操作步骤145

观察149

结果表格149

疑难问题和解决方案150

注意事项150

操作流程150

实验4.3 变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析对宏基因组细菌多态性研究152

导言152

原理152

所需试剂及其作用153

操作步骤154

观察158

结果表格158

疑难问题和解决方案158

操作流程159

实验4.4 脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析159

导言160

原理161

所需试剂及其作用162

操作步骤163

观察165

结果表格165

疑难问题和解决方案165

注意事项166

操作流程166

实验4.5 细菌多重PCR快速检测168

导言168

原理169

所需试剂及其作用169

操作步骤171

观察171

结果表格171

疑难问题和解决方案172

注意事项172

操作流程172

实验4.6 肠杆菌基因间重复共有序列和细菌基因外重复回文序列PCR技术173

导言173

原理174

所需试剂及其作用175

操作步骤177

观察179

结果表格179

疑难问题和解决方案179

注意事项180

操作流程180

第5章 分子微生物学计算机辅助研究181

实验5.1 基因序列分析181

导言181

样品序列分析工具181

原理181

操作步骤182

操作流程187

实验5.2 基因库序列的递交188

导言188

原理188

操作步骤189

操作流程194

实验5.3 系统发育树194

导言194

解读树195

系统发育树软件195

原理195

操作步骤197

操作流程201

实验5.4 引物设计201

导言201

用软件设计引物202

引物设计指南203

使用NetPrimer软件设计引物程序203

操作流程206

第6章 分子微生物学的应用207

实验6.1 细菌生物膜在玻璃管中的形成207

导言207

原理208

所需试剂及其作用209

操作步骤209

观察209

结果表格210

疑难问题和解决方案210

注意事项211

操作流程211

实验6.2 微孔板中细菌生物膜形成的筛选212

导言212

原理213

所需试剂及其作用213

操作步骤214

观察214

结果表格214

疑难问题和解决方法215

注意事项215

操作流程216

实验6.3 生物膜共聚焦激光扫描显微镜分析217

导言217

原理218

所需试剂及其作用219

操作步骤220

观察221

结果表格221

注意事项222

疑难问题和解决方案222

操作流程222

实验6.4 细菌生物膜荧光显微镜和图像分析223

导言223

原理223

所需试剂及其作用224

操作步骤225

结果表格228

注意事项228

操作流程228

实验6.5 生物表面活性剂的筛选229

导言229

原理230

所需试剂及其作用231

操作步骤231

观察232

结果表格232

操作流程232

实验6.6 多环芳烃细菌生物治理的光谱光度分析233

导言233

原理233

所需试剂及其作用234

操作步骤235

观察235

结果表格236

注意事项236

操作流程236

实验6.7 筛选金属富集细菌的硫化氢实验237

导言237

原理237

所需试剂及其作用238

操作步骤239

观察239

结果表格240

疑难问题和解决方案240

注意事项240

操作流程240

参考文献243

进一步读物244

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