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目 录1

引 言1

第一章细胞杂交瘤的实验技术1

第一节淋巴细胞杂交瘤的发展简史1

第二节杂交瘤技术的原理2

第三节杂交瘤技术的基本条件4

（一）选择骨髓瘤细胞4

（二）选择免疫动物7

（三）HAT培养液8

（四）细胞融合剂10

（五）胎牛血清13

（六）饲养细胞14

（七）免 疫15

第四节杂交瘤技术的基本操作方法16

（一）免疫小鼠脾细胞悬液的收集17

（二）小鼠腹腔巨噬细胞的收集18

（三）小鼠骨髓瘤细胞的准备18

（四）细胞融合的步骤与方法19

第五节杂交瘤细胞的筛选23

（一）选择筛选方法的原则24

（二）常用筛选方法简介25

第六节杂交瘤细胞的克隆化31

（一）有限稀释法32

（三）显微操作法34

（二）软琼脂培养法34

（四）应用荧光激活细胞分类器35

第七节单克隆抗体的鉴定36

（一）单克隆抗体的Ig类型鉴定36

（二）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳36

（三）凝胶等电点聚焦电泳38

第八节单克隆抗体的大量制备41

（一）体外培养法41

（二）动物体内培养法42

（三）微囊技术43

第九节杂交瘤细胞的冷冻保存43

第十节单克隆抗体的分离、纯化与保存45

（一）盐析法纯化单克隆抗体46

（二）亲和层析法纯化单克隆抗体47

（三）DEAE离子交换层析法48

（四）蛋白质A-琼脂糖珠亲和层析法49

（五）单克隆抗体的保存50

第十一节小鼠单克隆抗体的某些理化性质51

第十二节关于预防污染问题52

第二章单克隆抗体的应用54

第一节在某些基因调控方面的应用54

（一）绘制人类基因图54

（二）DNA复制检测55

（三）遗传缺陷的基因互补56

（四）控制肿瘤的恶性行为57

第二节应用单克隆抗体寻找特异性抗原58

第三节单克隆抗体在细胞免疫59

方面的研究及应用59

（一）抗人T细胞单克隆抗体的分类59

（二）抗人T细胞单克隆抗体在人60

T细胞研究中的应用60

第四节单克隆抗体在体液免疫方面的研究62

（一）抗人IgG单克隆抗体62

（二）抗人IgA单克隆抗体63

（三）抗人IgE单克隆抗体64

第五节单克隆抗体在肿瘤学中的应用64

（一）应用单克隆抗体探讨肿瘤抗原64

抗原的初步成果65

（二）应用单克隆抗体探索肿瘤65

（三）单克隆抗体在肿瘤治疗、78

诊断方面的应用78

第六节单克隆抗体在病毒方面的应用81

（一）流感病毒82

（二）乙型肝炎病毒82

（三）脊髓灰质炎病毒84

（四）其 它85

第七节单克隆抗体在寄生虫方面的86

研究与应用86

第八节单克隆抗体在钩端螺旋体88

方面的研究88

方面的应用89

第十节单克隆抗体在组织移植89

第九节 单克隆抗体在霍乱毒素89

方面的研究89

第十一节单克隆抗体在自身抗体91

方面的研究与应用91

第十二节单克隆抗体用于肌无力的研究93

第十三节单克隆抗体用于硬皮病的研究94

第十四节单克隆抗体在干扰素方面的应用95

第十五节单克隆抗体在酶学中的应用95

（一）抗人前列腺酸性磷酸酶的95

单克隆抗体95

（二）抗β-半乳糖苷酶的单克隆抗体96

受体及其它领域的应用98

第十六节单克隆抗体在激素、98

结语101

附录104

（一）细胞杂交瘤技术中主要试剂配制104

（二）小鼠骨髓瘤细胞的培养方法106

（三）无血清培养液的应用107

（四）金黄色葡萄球菌蛋白A108

的纯化方法108

（五）荧光抗体标记技术109

（六）杂交瘤技术流程概要111

（七）本书英语缩写检索112

参考文献114