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第一章 电子显微镜技术发展简史1

第一节 电子显微镜发展简史2

一、国外电子显微镜生产简况2

二、国内电子显微镜生产简况2

三、电子显微镜的发展3

第二节 电子显微镜技术的发展与应用3

一、电子显微镜技术的发展3

二、电子显微镜技术的应用5

第三节 其他显微技术的发展6

第四节 电子显微学主要学术组织和刊物7

一、国内电子显微学学术组织及刊物7

二、国际电子显微学的主要期刊杂志及主要参考书7

提要8

思考题9

第二章 样品包埋块制作10

第一节 概述10

一、光镜和电镜样品差异10

二、包埋块制作程序与质量标准11

第二节 取材与固定12

一、取材12

二、固定12

第三节 漂洗与脱水22

一、漂洗22

二、脱水23

第四节 浸透与包埋25

一、包埋剂25

二、包埋剂配制注意事项29

三、包埋模具29

第五节 制作包埋块常规实验方法30

一、取材与固定30

二、脱水与浸透31

三、包埋与聚合31

四、制样常规操作程序32

第六节 制作包埋块特殊实验方法33

一、组织的快速包埋33

二、重新包埋35

三、可逆包埋技术37

提要38

思考题38

第三章 超薄切片40

第一节 切片刀具与修整包埋块40

一、玻璃刀40

二、钻石刀41

三、制作水槽42

四、修整包埋块42

第二节 载网43

一、载网种类及特性43

二、载网的处理44

第三节 支持膜45

一、方华膜45

二、碳膜47

三、火棉胶基底碳膜48

四、硝化纤维素基底碳膜48

五、微筛膜49

六、单孔及大孔铜网制膜技巧51

第四节 切片51

一、组织面粗切52

二、切片前的调整52

三、切片53

四、切片问题分析与解决54

第五节 半薄切片57

一、切片装置及切片方法57

二、捞片、染色及保存58

提要59

思考题59

第四章 正染色61

第一节 概述61

一、电子显微镜图像反差形成原理61

二、染色的必要性62

第二节 染液62

一、醋酸双氧铀62

二、柠檬酸铅63

第三节 染色方法65

一、包埋前铀染色65

二、包埋后铀染色65

三、操作方法65

四、防污染措施66

第四节 染液特性及染色时间68

一、染液的渗透68

二、染液的特效染色68

三、染色时间69

提要69

思考题70

第五章 免疫电子显微镜术71

第一节 概述71

一、胶体金标记技术的发展71

二、胶体金标记优越性72

第二节 抗体73

一、抗原与抗体73

二、抗体的应用74

第三节 样品制备74

一、低温样品制备技术75

二、常规样品制备技术78

第四节 载网处理与超薄切片80

一、载网处理80

二、超薄切片81

第五节 胶体金结合物制备81

一、蛋白质A-金颗粒复合物的制备81

二、免疫球蛋白-金颗粒复合物的制备84

第六节 免疫细胞化学标记84

一、免疫球蛋白-金颗粒复合物标记84

二、蛋白质A-金复合物标记87

三、免疫酶细胞化学标记方法89

四、影响特异性标记因素90

第七节 扫描电镜免疫标记技术90

一、样品处理方法91

二、免疫标记92

三、被标记样品的处理93

第八节 冷冻断裂细胞化学93

一、标记特点94

二、标记方法94

提要95

思考题96

第六章 冷冻复型98

第一节 概述98

一、技术特点与应用98

二、实验原理与实验过程100

第二节 冷冻复型装置101

一、装置类型101

二、仪器装置介绍102

第三节 操作方法104

一、样品取材104

二、样品放置105

三、样品冷冻与断裂106

四、冷冻蚀刻107

五、真空喷涂108

六、复型膜剥离110

第四节 样品的冰晶损伤112

一、冰晶的形成与危害112

二、防冰晶措施112

第五节 冷冻复型细胞断裂面命名113

一、ABCD命名法114

二、通用命名法114

第六节 快速冷冻深度蚀刻旋转投影技术115

提要115

思考题116

第七章 冷冻固定和冷冻置换118

第一节 冷冻固定118

一、特点118

二、机制119

三、冷冻剂119

四、防冻剂120

五、冷冻固定方法120

第二节 冷冻置换123

一、冷冻置换介质124

二、冷冻置换方法125

三、影响冷冻置换因素127

提要128

思考题129

第八章 负染色技术130

第一节 概述130

第二节 染液种类及其特性131

一、磷钨酸131

二、醋酸双氧铀132

三、甲酸铀132

四、钼酸铵132

第三节 样品的制备132

一、取样方式132

二、支持膜133

第四节 负染色操作方法134

一、操作方法134

二、戊二醛固定病毒样品染色136

三、对照样品染色137

第五节 负染色技术技巧137

一、影响负染色因素137

二、电镜观察138

提要139

思考题140

第九章 核酸大分子电镜样品制备技术141

第一节 概述141

第二节 实验方法142

一、展开法142

二、扩散法143

三、一步释放法144

四、展膜技术的改进144

五、金属投影与电镜观察145

提要148

思考题149

第十章 透射电子显微镜150

第一节 概述150

一、电子显微镜特征150

二、产品类型151

三、电子显微镜发展简史151

第二节 电子光学基本知识152

一、光学显微镜局限性152

二、电子束特性153

第三节 透射电子显微镜结构与功能154

一、电镜镜筒154

二、真空系统160

三、电源系统161

第四节 电子显微镜调整与维护162

一、对中调整162

二、日常维护163

第五节 电子显微镜的使用164

一、工作条件选择164

二、电镜使用要点165

三、电镜观察技巧167

提要168

思考题169

第十一章 扫描电子显微镜及样品制备171

第一节 扫描电镜结构及原理172

一、扫描电镜与透射电镜区别172

二、扫描电镜结构功能172

三、扫描电镜工作原理175

四、图像分辨率及放大率175

第二节 扫描电镜常规样品制备176

一、样品要求176

二、样品固定及脱水177

三、样品干燥178

四、金属喷涂182

第三节 扫描电镜冷冻断裂技术184

一、概述184

二、冷冻断裂实验步骤185

提要186

思考题187

第十二章 电子显微镜的实验室安全188

第一节 人身与设备安全188

一、人身安全188

二、仪器安全190

第二节 化学药品安全191

一、化学药品的安全使用191

二、化学药品的毒性防护193

第三节 实验室安全194

一、安全防火195

二、安全用电196

提要196

思考题196

参考文献198

中英文名词索引201