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第一篇 葡萄球菌肠毒素1

1.历史回顾1

葡萄球菌毒素的发现1

金葡菌各型肠毒素的发现3

金葡菌肠毒素的命名问题4

2.金葡菌毒素病的特征6

临床症状6

临床诊断7

治疗8

中毒机理9

3.流行病学12

发病率12

微生物来源13

金葡菌污染食品的途径24

食物中毒的预防25

肠毒素的免疫27

4.葡萄球菌的分类29

种类29

型别31

种的鉴定36

5.葡萄球菌的鉴定36

属的鉴定36

型的鉴定37

其他鉴定方法37

葡萄球菌的形态学40

致病性43

6.影响金葡菌生长和产毒因素45

实验条件45

实验培养基产毒试验49

亲和层析法提纯A、B型肠毒素58

7.肠毒素的提纯和鉴定58

等电点聚焦法提纯SEB61

离子交换和羟基磷灰石层析提纯SEA63

离子交换纤维素层析和葡聚糖凝胶过滤提纯SEC1和SEC265

离子交换层析凝胶过滤五步程序提纯SEC367

层析等电聚焦技术提纯金葡菌D型肠毒素69

染料配位体亲和层析法提纯A型肠毒素74

8.金葡菌肠毒素的特性77

肠毒素的物理化学性质77

各型肠毒素的氨基酸序列分析79

肠毒素的稳定性84

肠毒素活性中心问题85

金葡菌肠毒素的结构87

C1型肠毒素羧基末端的生物学和免疫学性质88

9.葡萄球菌肠毒素免疫血清制备95

制备免疫血清条件95

SEA和SEB抗血清的制备97

SEC1抗血清制备99

抗-SEC2血清制备102

抗-SED血清制备103

肠毒素各型间的交叉反应104

10.肠毒素单克隆抗体制备110

制备肠毒素单克隆抗体的杂交廇技术110

肠毒素单克隆抗体特征和交叉反应111

对肠毒素共同决定基的抗体114

单克隆抗体和多克隆抗体的比较116

单克隆抗体用于结构研究117

结语117

11.葡萄球菌肠毒素的检测119

生物学试验方法119

葡萄球菌肠毒素的血清学试验120

基同探针的研究132

12.食品中葡萄球菌肠毒索的检测141

食品中肠毒素的提取和浓缩141

检测食品中肠毒素的快速方法142

13.金黄色葡萄球菌肠毒素分子遗传学研究148

A型肠毒素的分子遗传学研究148

B型肠毒素的分子遗传学研究152

C1型肠毒素的分子遗传学研究155

C3型肠毒素的分子遗传学研究159

D型肠毒素的分子遗传学研究160

E型肠毒素的分子遗传学研究163

基因探针研究164

结语166

14.葡萄球菌肠毒素的生物学活性169

肠毒素和TSST-1的免疫调节作用169

TSST-1、SEA、SEB和SEC对兔脾细胞的结合力173

TSST-1和肠毒素诱导白介素-1产生175

金葡菌肠毒素和TSST-1刺激人、鼠淋巴细胞产生IL-2177

葡萄球菌肠毒素和TSST-1刺激人淋巴细胞产生Υ-干扰素179

TSST-1、肠毒素刺激人淋巴细胞分泌肿瘤坏死因子179

肠毒素及相关毒素的结构184

15.金葡菌肠毒素及其相关毒素研究的新进展184

毒素与MHCⅡ重型分子的结合187

毒素通过Vβ激T细胞189

小鼠对毒素的内源性表达191

细菌毒素的致病性分析193

细菌与宿主的相互关系194

第二篇 金葡萄中毒性休克综合征和中毒性休克毒素197

1.历史问题197

地理分布199

流行病学调查199

2.中毒性休克综合征的流行病学199

暂时下降趋势200

性别、人种和年龄200

月经状况201

TSS流行病学研究新进展201

TSS的危险因子202

中毒性休克综合征在各国的发现205

3.TSS临床表现和诊断208

评价与监测209

预期疗法209

4.中毒性休克综合征的治疗209

5.中毒性休克综合征的病原学215

噬菌体型215

对重金属盐和抗生素抗性215

溶血和蛋白分解活性216

对动物的致死性216

TSST—1和其它葡萄球菌毒素关系217

与TSS有关金葡菌的遗传型特征219

TSST—1附属基因调控219

金葡菌以外微生物在引起TSS的作用220

急性期和恢复期TSS病人抗—TSST-I滴度222

6.TSS病人及健康人血清抗-TSST-1抗体水平调查222

不同年代和不同年龄人群血清抗体滴度223

病人及健康人携带产毒金葡菌及抗TSST-1抗体水平调查224

病人及健康人血清中含抗-肠毒素及抗TSST-1抗体滴度分析227

7.致病机理研究231

金葡菌产物的致病性231

其他微生物产物的致病性232

TSS发生的各种条件232

月经塞与TSS发病的关系234

产TSST-1金葡菌在阴道内生长产毒条件分析235

动物模型研究237

8.金葡菌的生长和TSST-1的体外合成242

气体流速对金葡菌生长和产毒影响242

分解O2对金葡菌生长和产毒影响243

C02对金葡菌产毒和生长的影响244

肉汤培养基和人工月经对金葡菌生长和产毒影响的比较245

阴道菌丛对金葡菌生长和产毒影响246

人工月经对金葡菌生长和产毒影响246

9.TSST-1的提纯及其物理化学和免疫学性质252

提纯程序252

TSST—1的生物化学等性质253

“F”型肠毒素和热原性外毒素(PEC)一致性研究258

TSST-1的生物学活性259

10.TSST-1结构和功能分析264

在体外用木瓜酶消化TSST-1264

溴化氰处理TSST-1266

11.TSST-1免疫血清的制备267

多克隆抗血清制备267

TSST-1单克隆抗体研究267

TSST-1的抗原性和免疫保护问题273

双向免疫琼脂扩散275

12.TSST-1的检测275

等电点聚焦法276

Western blotting检测法276

反向乳胶凝集试验(RPLA)277

酶联免疫吸附试验(ELISA)278

菌落免疫印迹试验280

基因探针检测282

Southern杂交试验285

13.TSST-1分子遗传学研究289

生物型同TSST-1表达关系289

TSS-1的遗传学成分290

TSST-1基因由一变异遗传性成分编码291

TSST-1基因核苷酸序列分析295

TSST-1表达调控295

14.TSST-1研究的回顾及展望297

人类存在的TSST-1抗体的研究297

人和动物来源株产TSST-1的分析297

人奶和牛奶中存在TSST-1抗体可能性298

TSST-1和TSS预防的某些研究设想299

今后工作中需要解决的问题300