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目录1

第1章 生物化学实验基本知识1

1.1 生物化学实验室规则1

1.2 生物化学实验室安全与防护常识1

1.3 化学药品的使用和储藏3

1.4 实验误差与数据处理5

1.5 实验记录与报告8

1.6 实验室常用仪器的使用10

2.1 生物化学实验技术发展简史20

第2章 现代生化实验技术20

2.2 离心技术21

2.3 光谱技术27

2.4 层析技术33

2.5 电泳技术42

2.6 免疫化学技术56

2.7 基因工程技术62

2.8 生物大分子的制备66

第3章 基础实验83

实验1 糖的呈色反应和定性鉴定83

实验2 总糖和还原糖的测定（一）——Fehling试剂热滴定法87

实验3 总糖和还原糖的测定（二）——3,5-二硝基水杨酸法91

实验4 血糖含量的测定——邻甲苯胺法94

实验5 粗脂肪的提取和测定96

实验6 血清总胆固醇的测定98

实验7 脂肪碘值的测定100

实验8 氨基酸的分离与鉴定——双向层析法102

实验9 蛋白质的两性性质及等电点的测定105

实验10 蛋白质含量的测定（一）——微量凯氏定氮法107

实验11 蛋白质含量的测定（二）——双缩脲法111

实验12 蛋白质含量的测定（三）——Folin-酚法114

实验13 蛋白质含量的测定（四）——紫外（UV）吸收测定法117

实验14 蛋白质含量的测定（五）——考马斯亮蓝染色法119

实验15 牛乳中酪蛋白的制备121

实验16 紫外吸收法测定核酸的含量123

实验17 酵母RNA的提取及组分鉴定125

实验18 质粒DNA的微量制备127

实验19 小牛胸腺DNA的制备——浓盐法130

实验20 植物中DNA的提取132

实验21 酶的特性——底物专一性134

实验22 影响酶促反应的因素——温度、pH和抑制剂136

实验23 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定139

实验24 胰蛋白酶的制备及活力的测定141

实验25 乳酸脱氢酶活力测定145

实验26 多酚氧化酶的纯化和活力测定147

实验27 维生素A的测定——比色法149

实验28 维生素B1的荧光测定法151

实验29 维生素B2（核黄素）的荧光测定法153

实验30 肾上腺素的提取和测定156

实验31 叶绿素含量测定158

实验32 总黄酮的提取和测定159

实验33 肌糖原的酵解作用161

实验34 发酵过程中无机磷的利用163

实验35 氨基转换作用165

实验36 脂肪酸β-氧化167

第4章 技术实验169

实验37 蛋白质相对分子质量的测定（一）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法169

实验38 蛋白质相对分子质量的测定（二）——葡聚糖凝胶过滤法172

实验39 血清蛋白的分离——聚丙烯酰胺凝胶电泳法176

实验40 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白179

实验41 不同相对分子质量蛋白质的分离——凝胶柱层析法182

实验42 血清白蛋白的分离纯化185

实验43 离子交换层析法分离氨基酸188

实验44 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳190

实验45 质粒DNA限制性酶切及琼脂糖凝胶电泳分离鉴定194

实验46 Southern印迹技术198

实验47 兔抗人血清抗体的制备和效价测定200

实验48 单向定量免疫电泳203

实验49 酶联免疫吸附测定205

第5章 设计实验209

实验50 果蔬维生素C含量测定及其分析209

实验51 蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定212

第6章 综合实验212

实验52 基因克隆技术pGEM-XY1重组质粒的构建和鉴定216

实验53 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定225

附录229

一、常用缓冲液的配制229

二、酸、碱、盐及有机溶剂的基本数据234

三、硫酸铵饱和度的常用表236

四、常见蛋白质相对分子质量参考表238

五、凝胶染料的种类及特点239

六、层析法常用数据表及性质240

参考文献244