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第1篇 细胞免疫技术3

第1章 细胞分离及分型3

第1节 外周血单个核细胞的分离3

第2节 B细胞分离5

第3节 T细胞分离7

第4节 自然杀伤细胞的制备8

第5节 单核细胞的分离10

第6节 人表皮朗汉斯细胞的分离12

第7节 多形核白细胞的分离15

第8节 流式细胞仪分型技术17

第2章 细胞的体外制备20

第1节 树突状细胞的体外制备20

第2节 LAK细胞的培养21

第3节 TIL细胞的培养23

第4节 T细胞克隆的制备24

第5节 人NK细胞克隆的制备27

第1节 ［3H］-脱氧胸苷掺入检测法30

第3章 细胞增殖测定30

第2节 MTT比色法32

第4章 细胞毒作用的测定35

第1节 补体依赖的细胞介导的细胞毒作用35

第2节 细胞介导的细胞毒作用37

第5章 细胞凋亡分析40

第1节 细胞凋亡形态学分析40

第2节 细胞凋亡生化指标观察45

第3节 流式细胞仪法47

第1节 钙流测定52

第6章 细胞激活的有关实验52

第2节 蛋白质酪氨酸残基的磷酸化检测55

第3节 超氧化物释放的测定58

第4节 炎症介质释放试验59

第5节 TNFα的检测(生物学检测法)61

第6节 IL-2的检测(生物学检测法)62

第7节 细胞因子mRNA的检测64

第8节 促细胞分裂剂激活单个核细胞67

第1节 细胞株的传代培养70

第7章 细胞培养的一般技术70

第2节 支持物培养法培养贴壁细胞74

第3节 细胞培养污染的检测与去除75

第2篇 免疫化学技术87

第8章 抗血清制备87

第1节 抗原纯化及制备的基本方法87

第2节 动物免疫方案100

第3节 免疫动物的采血与血清制备102

第1节 概述107

第9章 单克隆抗体的制备107

第2节 用于鼠细胞融合的配对细胞的培养和选择110

第3节 通过细胞融合得到B细胞杂交瘤112

第4节 阳性杂交瘤克隆的筛选及通过有限性稀释法再克隆114

第5节 通过EBV制备人单克隆抗体117

第6节 体外细胞免疫119

第7节 实验室规模的抗体制备121

第8节 单克隆抗体的纯化124

第1节 硫酸铵沉淀法127

第10章 抗体的纯化127

第2节 DEAE离子交换层析法129

第3节 羟磷灰石层析纯化抗体131

第4节 抗体的辛酸纯化法133

第5节 Sephadex凝胶过滤纯化抗体134

第6节 免疫球蛋白G的亲和层析纯化法(蛋白A或蛋白G法)136

第7节 应用酶解从IgG制备F(ab′)2的方法137

第8节 从F(ab′)2制备Fab′140

第9节 免疫球蛋白A纯化142

第11章 抗体分子标记技术146

第1节 抗体的125I标记法146

第2节 抗体的酶标记法148

第3节 抗体的生物素化标记法150

第4节 抗体的荧光标记法152

第5节 生物合成过程的标记153

第6节 免疫胶体金标记抗体及检测抗原155

第12章 酶联免疫检测技术161

第1节 间接法测抗体161

第3篇 体液免疫检测技术161

第2节 双抗体夹心法测抗原163

第3节 竞争法测抗原165

第4节 酶联免疫试验的量反应分析167

第5节 酶联免疫试验质反应分析168

第13章 免疫印迹技术170

第1节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳170

第2节 免疫印迹(Western blotting)174

第14章 免疫荧光技术177

第1节 直接免疫荧光法测抗原177

第2节 间接免疫荧光法测抗体178

第3节 标本的制备180

第15章 补体测定技术183

第1节 CH50法测总补体活性183

第2节 补体旁路活化途径的溶血活性(AP-H50)测定185

第3节 C3含量测定186

第1节 聚乙二醇沉淀法测定免疫复合物188

第16章 免疫复合物测定188

第2节 C1q固相法测定免疫复合物189

第3节 固相抗C3ELISA法测定免疫复合物190

第4篇 人类白细胞抗原(HLA)测定195

第17章 HLA检测技术195

第1节 HLA的抗体分型技术195

第2节 HLA的PCR分型技术196

第18章 HLA的抗体筛选技术199

第1节 淋巴细胞毒交叉配合试验199

第2节 免疫磁珠流式细胞仪方法201

第5篇 有关免疫调节剂筛选及评估机体免疫状态的实验205

第19章 非特异免疫功能的检测205

第1节 小白鼠碳粉廓清试验205

第2节 小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验206

第3节 溶菌酶测定法(光学法)207

第4节 溶菌酶测定法(平板法)209

第20章 特异性免疫功能的检测211

第1节 血清溶血素测定211

第2节 抗体形成细胞的测定212

第3节 特异性淋巴细胞转化试验214

第1节 免疫功能低下动物模型216

第21章 有关免疫实验的动物模型216

第2节 大鼠同种被动皮肤过敏反应217

第3节 Ⅱ型变态反应动物模型218

第4节 Ⅲ型变态反应动物模型219

第5节 二硝基氟苯诱导小鼠的迟发型变态反应220

第22章 小分子糖抗原的分离、鉴定和抗体的制备225

第1节 糖脂的分析和鉴定225

第6篇 糖生物学研究中一些常用免疫学方法225

第2节 鞘糖脂(GSL)抗体的制备和鉴定228

第3节 人工合成糖偶联物抗原与其抗体制备231

第4节 拟糖脂抗原合成234

第23章 免疫球蛋白糖链的检测239

第1节 免疫球蛋白G中糖型G(0)的检测239

第2节 免疫球蛋白Al中异常糖链的检测241

第3节 应用糖特异性单克隆抗体检测糖蛋白抗原242

第4节 应用标记寡糖探针检测组织细胞表面凝集素样结合物244

第5节 糖配体与蛋白质受体相互作用的毛细管亲和色谱246

第7篇 免疫学实验的质量控制及数据处理253

第24章 免疫学实验的质量控制253

第1节 实验的可靠性分析253

第2节 实验的定量能力分析255

第3节 实验相似度的鉴定256

第25章 免疫学数据的特点与统计分析258

第1节 正常值确定258

第2节 研究群体对照259

附录1 常用缓冲溶液的配制方法260

附录2 蛋白质定量263

附录3 常用蛋白质检测和定量方法比较266

附录4 细胞蛋白质提取267

附录5 SDS-PEAG凝胶染色及干燥269

附录6 免疫酶反应底物272

附录7 培养液、血清及添加物274

附录8 Hanks液配方277

附录9 常用凝集素的单糖结合特异性和寡糖结合特异性278

附录10 主要免疫试剂供应商网站介绍282