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实验室规则1

实验误差与数据处理2

实验记录及实验报告4

第一章 生化基本技能实验5

实验一　血液及组织样品的制备5

实验二　蛋白质的沉淀反应8

实验三　蛋白质的两性反应和等电点测定9

实验四　酪蛋白的制备11

实验五　氨基氮的测定——甲醛滴定法12

实验六 总氮量的测定——微量凯氏定氮法14

实验七 温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响17

实验八　琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制19

实验九　淀粉酶的活力及比活力测定20

实验十　维生素C的定量测定21

实验十一　费林试剂热滴定定糖法23

实验十二　肝糖原的提取与鉴定25

实验十三　果胶的提取26

实验十四　粗脂肪的定量测定——索氏抽提法28

实验十五　脂肪碘值的测定29

实验十六　脂肪酸价的测定31

第二章　分光光度技术32

第一节 基本原理32

一、光的基本知识32

二、朗伯－比尔（Lambert-Beer）定律32

第二节 分光光度计结构简介34

一、光源34

二、单色器34

三、狭缝34

四、比色杯34

五、检测系统35

第三节 分光光度技术的应用35

一、测定溶液中物质的含量35

二、用紫外光谱鉴定化合物36

第四节　分光光度法的误差36

第五节 常见国产分光光度计的使用37

一、721型分光光度计37

二、722型分光光度计38

三、751型分光光度计38

四、使用分光光度计时的注意事项39

实验十七　双缩脲法测定蛋白质含量40

实验十八　Folin－酚法测定蛋白质含量41

实验十九　紫外吸收法测定蛋白质含量43

实验二十　蛋白酶活力测定45

实验二十一　血清转氨酶活性测定47

实验二十二　血糖的定量测定49

实验二十三　总糖和还原糖测定51

实验二十四　血清总脂测定52

实验二十五　动物组织中核酸的提取与鉴定54

实验二十六　酵母核糖核酸的提取及组分鉴定57

实验二十七　紫外吸收法测定核酸的含量59

实验二十八　二苯胺显色法测定DNA含量61

实验二十九　地衣酚显色法测定RNA含量62

实验三十 定磷法测定核酸含量63

实验三十一　血清无机磷的定量测定64

第三章　电泳技术66

第一节 基本原理66

第二节 醋酸纤维薄膜电泳69

第三节　琼脂糖凝胶电泳70

第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳70

第五节 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳73

第六节　免疫电泳73

第七节 等电聚焦电泳74

实验三十二　乙酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质74

实验三十三　聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分离蛋白质77

实验三十四　血清乳酸脱氢酶同工酶的分离与测定80

实验三十五　DNA的琼脂糖凝胶电泳82

实验三十六　等电聚焦法测定蛋白质等电点84

实验三十七　对流免疫电泳87

第四章　层析技术90

第一节 基本原理90

第二节　吸附层析91

一、原理91

二、吸附剂的选择91

三、吸附能力91

第三节　分配层析92

一、原理92

二、操作要点92

第四节 离子交换层析93

一、原理93

二、离子交换剂的类型93

三、离子交换层析基本操作94

第五节　凝胶层析95

一、原理95

二、凝胶的种类97

三、操作方法100

四、应用101

第六节　亲和层析101

一、原理101

二、操作方法102

第七节 高效液相色谱法103

一、原理103

二、高效液相色谱仪103

三、色谱方法的选择104

四、操作及注意事项105

实验三十八　纸层析法分离氨基酸105

实验三十九　薄层层析法分离氨基酸107

实验四十 血清脂类硅胶G薄层层析108

实验四十一　葡聚糖凝胶SephadexG-25柱层析法脱盐和分离蛋白质109

实验四十二　葡聚糖凝胶SephadexG-100柱层析法测定蛋白质相对分子质量111

实验四十三　离子交换柱层析法分离混合氨基酸113

实验四十四　离子交换柱层析法制备无离子水114

第五章　离心技术117

第一节　基本原理117

一、相对离心力117

二、沉降系数118

三、沉降速度119

四、沉降时间119

第二节 离心机的性能及用途119

一、低速离心机120

二、高速离心机120

三、超速离心机120

第三节 离心方法121

一、差速离心121

二、速度区带离心121

三、等密度梯度离心122

四、离心操作要领122

实验四十五 细胞核的分离和纯化123

实验四十六 质粒DNA的提取125

第六章　生物大分子制备技术128

第一节 材料的选择和预处理128

第二节 细胞的破碎及细胞器的分离128

一、细胞的破碎128

二、细胞器的分离130

第三节 提取和纯化130

一、蛋白质（包括酶）的提取130

二、蛋白质的分离纯化131

三、核酸的提取132

四、核酸的纯化133

五、核酸的浓缩133

第四节　浓缩、干燥及保存134

一、样品的浓缩134

二、干燥134

三、保存135

实验四十七　动物组织DNA与RNA的分离和提纯136

实验四十八　蛋清溶菌酶的制备及活力测定138

实验四十九　血清免疫球蛋白G的分高纯化及鉴定140

实验五十 细胞色素c的制备及测定144

实验五十一　碱性磷酸酶的分离纯化149

附录153

一、试剂的配制153

（一）常用溶液浓度的单位及计算153

（二）标准溶液的配制与标定154

（三）常用缓冲溶液的配制155

（四）玻璃仪器的清洗及各种洗液的配制160

二、常用参数162

（一）一般化学试剂的分级162

（二）易变质和需要特殊方法保存的试剂162

（三）常用酸碱的相对密度和质量分数，物质的量浓度的关系163

（四）硫酸铵饱和度常用表163

（五）指示剂165

（六）元素原子量表167

（七）离心机转速与相对离心力的换算168