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引言1

第一节 生物技术的含义及其发展简史1

第二节 生物技术的基本内容3

一、细胞工程3

二、基因工程3

三、酶工程3

四、发酵工程3

第三节 生物技术与其他基础学科的关系及其应用前景4

一、生物技术在农业（农、林、牧、副、渔）上的应用5

二、生物技术在医药上的应用5

三、生物技术在解决能源危机、治理环境污染方面的应用6

四、生物技术在工业上的应用6

第一章　植物细胞工程基本原理8

第一节 植物细胞的形态和结构9

一、植物细胞的形状和大小9

二、植物细胞的结构10

第二节 植物细胞的繁殖22

一、有丝分裂22

二、无丝分裂24

三、减数分裂24

第三节 植物细胞的全能性理论26

一、植物细胞的生长27

二、植物细胞的分化与脱分化28

三、愈伤组织中细胞的再分化与驯化29

四、植物的再生作用30

五、植物的遗传与变异30

第二章　植物细胞工程基本设备及操作技术31

第一节 实验室规模、设备及用品31

一、实验室规模31

二、实验室设备及用品31

三、实验用品的洗涤33

第二节 植物细胞工程基本操作技术34

一、培养基及其配制34

二、外植体选择41

三、接种42

四、培养、观察与记载45

五、炼苗与移栽46

第三章　植物体外形态发生49

第一节　愈伤组织49

一、愈伤组织的形成49

二、愈伤组织的生长52

第二节　植物离体形态发生55

一、器官发生途径55

二、胚胎发生途径58

三、植物离体培养中形态发生调控64

第三节 人工种子的研制68

一、人工种子的优越性及其研制中存在的问题68

二、胚状体的高频率发生与同步化培养69

三、人工种皮和人工胚乳的研制70

四、人工种子的制作70

第四章　植物无性系快速繁殖与无病毒种苗生产73

第一节 植物无性系快速繁殖73

一、植物无性系快速繁殖的意义和应用73

二、植物无性系快速繁殖的途径与方法76

三、植物快速繁殖的关键技术环节79

四、植物快速繁殖的影响因子83

五、兰花的快速繁殖操作实例87

第二节 植物脱毒与无病毒种苗的生产88

一、植物脱毒的意义88

二、植物脱毒技术89

三、马铃薯茎尖脱毒操作实例95

第五章　植物单细胞培养与突变体的筛选96

第一节 植物单细胞的分离96

一、由外植体分离单细胞96

二、由愈伤组织分离单细胞98

第二节 植物单细胞培养方法98

一、单细胞培养的方法98

二、影响单细胞培养的因素101

第三节 植物细胞突变体的筛选103

一、细胞突变体的特征103

二、细胞突变体筛选的意义103

三、细胞突变体筛选的一般技术104

四、突变体筛选操作实例107

第六章　植物细胞悬浮培养与次生代谢物质生产109

第一节 细胞的初始培养109

一、悬浮细胞的来源109

二、细胞的振荡培养110

三、建立良好悬浮细胞系的技术要点111

第二节 高产细胞系筛选113

一、高产细胞系筛选的整体思路113

二、高产细胞系的筛选方法113

三、高产细胞系的稳定性及保存方法116

第三节 植物细胞悬浮培养方法117

一、细胞悬浮培养的类型117

二、细胞悬浮培养的培养基120

三、悬浮培养细胞的同步化121

四、悬浮培养中细胞的生长量和活力分析122

第四节　植物次生代谢物质生产122

一、植物次生代谢产物的主要类型123

二、生物反应器培养水母雪莲细胞产生黄酮类化合物操作实例125

第七章　植物原生质体培养与体细胞杂交130

第一节 植物原生质体的分离与纯化131

一、材料的选择和预处理132

二、分离植物原生质体的酶类及其纯化132

三、酶液的配制与渗透压的调控134

四、原生质体的分离、纯化与活力检测135

五、亚原生质体的制备137

第二节 植物原生质体的培养138

一、供体材料的选择138

二、原生质体培养基139

三、培养原生质体的植板密度141

四、原生质体的培养条件141

五、原生质体的培养方式142

六、原生质体培养中的形态发生144

第三节 植物细胞融合与体细胞杂交146

一、细胞融合146

二、体细胞杂种的筛选和鉴定156

第八章　植物细胞重组（拆合）与基因重组160

第一节 细胞重组（拆合）160

一、细胞重组的概念、发展和意义160

二、细胞重组方式160

三、核移植技术161

四、植物微核技术163

五、细胞器移植166

第二节　基因重组167

一、染色体数目变异168

二、染色体结构变异169

三、基因突变169

四、利用非整倍体技术进行异源基因的转移169

五、染色体微切割172

第九章　花药、花粉培养与单倍体育种174

第一节 花药培养174

一、培养基175

二、花药培养操作程序177

三、雄核发育过程和植株再生181

四、影响雄核发育的因子184

五、水稻花药培养操作实例186

第二节 花粉培养187

一、花粉的分离方法188

二、花粉的培养方法189

三、茄子花粉培养操作实例191

第三节 单倍体育种192

一、单倍体育种的优越性192

二、单倍体植物的产生195

三、单倍体植株的染色体加倍技术197

第十章　子房、胚珠培养与试管受精200

第一节　子房培养200

第二节　胚珠培养200

第三节 未授粉子房和胚珠培养202

一、植物雌性单倍体离体诱导研究概况202

二、雌核发育的胚胎学203

三、影响未受精胚珠与子房培养的因素206

第四节　试管受精210

一、植物的子房内授粉210

二、雌蕊的离体授粉210

三、胚珠的试管受精211

四、植物试管受精的意义211

第十一章 被子植物的精、卵分离，培养与融合212

第一节 精子的分离与培养212

一、生殖细胞的分离212

二、精子的分离213

三、精子的纯化214

四、精子生活力的测定与保存214

五、精子的培养214

第二节 卵细胞的分离与培养215

一、卵细胞的分离方法215

二、卵细胞的培养216

第三节 精、卵融合与培养216

一、精、卵细胞融合方法216

二、影响融合的因素218

三、精、卵融合后的培养218

第十二章　胚胎培养与胚乳培养219

第一节 胚胎培养219

一、合子胚培养的方法219

二、幼胚培养的条件220

三、胚乳的看护培养222

第二节　胚乳培养224

一、外植体的选择与接种224

二、愈伤组织诱导225

三、器官发生226

四、胚乳胚状体发生226

五、培养条件227

六、胚乳愈伤组织的细胞学特征227

第三节 无融合生殖227

一、单倍体无融合生殖228

二、二倍体无融合生殖229

三、不定胚生殖230

四、无融合生殖的鉴别231

五、无融合生殖的应用232

主要参考文献233