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现代分子生物学模块实验指南 第2版
  • 李玉花,徐启江主编 著
  • 出版社: 北京:高等教育出版社
  • ISBN:9787040470574
  • 出版时间:2017
  • 标注页数:411页
  • 文件大小:47MB
  • 文件页数:419页
  • 主题词:分子生物学-实验-高等学校-教学参考资料

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图书目录

模块一 目的基因的克隆及序列分析1

1-1 RNA的提取及检测4

1-2 RT-PCR方法扩增目的基因13

1-3 cDNA末端快速扩增法(RACE)合成目的基因22

1-4目的基因的克隆37

1-5目的基因的序列测定及初步分析54

1-6 cDNA文库的构建及目的基因的筛选57

1-7 mRNA差别显示克隆差异表达基因72

1-8电子克隆法获得目的基因80

1-9化学合成法获得目的基因84

模块二 核酸分子杂交87

2-1 Southern杂交90

2-2 Northern杂交108

2-3原位杂交114

2-4原位RT-PCR127

模块三 大规模基因差异表达分析132

3-1基因芯片分析135

3-2基于第二代高通量测序技术的转录组测序分析140

3-3差异表达基因功能富集分析146

3-4实时荧光定量PCR检测基因表达151

模块四 单核苷酸多态性的检测157

4-1衍生酶切扩增多态性序列法160

4-2 Taqman荧光探针法165

4-3高分辫率熔解曲线法171

4-4定向诱导基因组局部突变技术178

模块五 目的基因的遗传转化182

5-1 PCR法克隆目的基因全长185

5-2 Gateway技术构建表达载体188

5-3农杆菌真空渗入法遗传转化193

5-4水稻愈伤组织的遗传转化197

5-5 RNAi发夹式载体构建及转化203

5-6 CRISPR/Cas9技术构建表达载体208

5-7大规模突变体库的构建214

模块六 蛋白质样品的制备、分离与鉴定219

6-1蛋白质样品的制备222

6-2蛋白质的定量227

6-3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质231

6-4双向电泳分离蛋白质238

6-5荧光标记差异分析凝胶电泳法分析差异表达蛋白质253

6-6蛋白质样品的质谱鉴定264

模块七 目的蛋白质表达、纯化与检测281

7-1目的基因原核表达质粒的构建284

7-2谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白的表达与纯化289

7-3组氨酸标签融合蛋白的表达与纯化293

7-4麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白的表达与纯化296

7-5免疫印迹检测目的蛋白质的表达300

模块八 蛋白质相互作用的研究305

8-1经典酵母双杂交308

8-2 Pull-down分析蛋白质相互作用319

8-3蛋白质亚细胞共定位328

8-4免疫共沉淀333

8-5 T7噬菌体展示筛选技术339

8-6细胞质酵母双杂交系统349

模块九 激光扫描共聚焦显微镜的应用355

9-1激光扫描共聚焦显微镜的基本使用358

9-2花粉管内钙离子梯度分布的观察363

9-3动物细胞微丝微管细胞核共定位观察369

9-4激光扫描共聚焦显微镜检测荧光蛋白372

模块十 生物信息学软件与数据库应用377

10-1常用分子生物学数据库检索380

10-2常用分子生物学软件使用391

10-3蛋白质结构及其相互作用预测405

附录409

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