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第一章 荧光定量 PCR技术及其应用1

第一节 定量PCR技术产生及其发展1

一、定量PCR技术产生背景1

二、定量PCR技术现状及进展2

三、定量PCR技术的展望4

第二节 荧光定量PCR的原理与特点5

一、荧光定量PCR定量的理论模式6

二、荧光阈值和Ct值6

三、荧光定量PCR技术的特点7

第三节 荧光定量PCR的类型9

一、荧光内参染料法9

二、序列特异性探针11

三、绝对定量与相对定量15

四、标准曲线的制作17

第四节 防污染的控制策略18

一、PCR污染的原因18

二、污染的监测19

三、防范污染的方法19

第五节 荧光定量PCR技术的应用20

一、肿瘤相关基因的检测20

二、转基因检测22

三、基因突变检测25

四、病毒检测27

五、病原菌检测32

六、寄生虫检测36

七、基因表达的相对定量分析37

第二章 环介导等温扩增技术及其应用43

第一节 环介导等温扩增法的原理43

第二节 引物设计及操作步骤45

一、引物设计45

二、反应体系45

三、结果判断46

第三节 环介导等温扩增技术的应用46

一、细菌检测47

二、病毒检测47

三、寄生虫检测48

第三章 焦磷酸测序技术及其应用50

第一节 焦磷酸测序技术的产生及其发展50

一、测序技术的发展现状50

二、测序技术的发展瓶颈52

三、焦磷酸测序技术的产生及发展53

四、焦磷酸测序技术的前景60

第二节 焦磷酸测序技术的原理及流程62

一、焦磷酸测序技术的一般原理62

二、焦磷酸测序技术的一般流程63

三、焦磷酸测序反应过程的具体原理66

第三节 焦磷酸测序技术引物的设计及结果分析67

一、利用软件进行引物设计的流程67

二、焦磷酸测序的结果分析69

第四节 焦磷酸测序技术的应用72

一、焦磷酸测序技术在各领域中的应用72

二、焦磷酸测序技术的深度测序优势74

第四章 变性高效液相色谱及其应用78

第一节 变性高效液相色谱的产生及其发展78

第二节 变性高效液相色谱的分析原理80

一、长度多态性分析原理80

二、单核苷酸多态性分析原理80

三、基因型多态性分析原理81

四、温度工作原理81

第三节 变性高效液相色谱实验设计及影响要素83

一、变性高效液相色谱推荐优化设计83

二、DHPLC基本操作流程88

第四节 变性高效液相色谱的应用91

一、DHPLC的应用技术91

二、DHPLC的应用领域96

第五节 变性高效液相色谱的标准化管理111

第五章 变性梯度凝胶电泳技术及其应用117

第一节 变性梯度凝胶电泳技术的原理117

一、变性梯度凝胶电泳的衍生技术118

二、PCR-DGGE方法的优点119

第二节 DGGE技术的引物设计120

一、引物设计原则120

二、Primer Premier 5.0使用简介121

三、Oligo 6.22使用简介124

四、DGGE/TGGE引物设计注意事项126

第三节 DGGE和TGGE技术的应用126

一、在食品微生物研究中的应用126

二、在口腔微生物研究中的应用130

三、在土壤微生物研究中的应用130

四、在环境微生物研究中的应用132

五、在其他领域中的应用133

第六章 肽核酸探针技术及其应用138

第一节 肽核酸探针技术的产生及发展138

一、肽核酸探针技术的产生138

二、肽核酸探针技术的迅速发展历程139

第二节 肽核酸探针技术的原理141

第三节 肽核酸相探针技术的引物和探针设计143

一、PNA探针的设计原则143

二、PNA探针的设计方案和流程144

第四节 肽核酸探针技术的应用146

一、PNA探针技术在微生物检测领域的应用146

二、PNA探针技术在疾病诊疗中的应用148

三、PNA在分子生物学领域中的应用150

四、PNA探针在生物传感器检测中的应用154

五、PNA在其他领域的应用155

六、PNA探针发展前景156

第七章 基因芯片159

第一节 基因芯片技术介绍159

第二节 基因芯片技术的原理及操作流程161

一、基本原理161

二、基本分类162

三、基因芯片的制作163

四、基因芯片的检测方法165

五、扫描阅读166

第三节 基因芯片技术的应用166

一、在基础研究中的应用166

二、在疾病诊断中的应用168

三、基因芯片在药物研究中的应用170

四、在环境保护和监测方面的应用171

五、基因芯片技术存在的问题与展望171