图书介绍

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现代分子生物学实验原理与技术
  • 陈德富,陈喜文主编(天津南开大学生命学院) 著
  • 出版社: 北京:科学出版社
  • ISBN:7030164334
  • 出版时间:2006
  • 标注页数:305页
  • 文件大小:48MB
  • 文件页数:317页
  • 主题词:分子生物学-实验

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图书目录

目录2

序2

前言2

第一篇 基本操作篇2

第一章 绪论2

第一节 基因操作技术2

第二节 实验室规则与安全5

第一节 常用器皿与仪器8

第二章 仪器操作与溶液配制8

第二节 溶液11

第三章 大肠杆菌培养与保存14

第一节 培养前准备14

第二节 大肠杆菌培养20

第三节 大肠杆菌菌株保存24

第四章 基因操作中的酶学反应27

第一节 常用酶的选购与保存27

第二节 限制性内切核酸酶28

第三节 限制性内切核酸酶消化DNA实验31

第四节 DNA作图36

第五节 连接酶37

第六节 其他核酸酶39

第五章 电泳技术43

第一节 基本原理43

第二节 琼脂糖凝胶电泳45

第三节 从琼脂糖凝胶中回收DNA49

第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳53

第五节 从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA56

第二篇 DNA篇60

第六章 DNA基本操作60

第一节 DNA保存60

第二节 DNA检测61

第三节 DNA浓缩62

第四节 DNA纯化64

第七章 扩增与提取质粒DNA70

第一节 质粒有关基本知识70

第二节 质粒DNA提取71

第三节 质粒DNA纯化79

第八章 DNA转化83

第一节 制备感受态细胞83

第二节 转化87

第九章 扩增与提取噬菌体DNA90

第一节 噬菌体生活史90

第二节 感染力测定90

第三节 噬菌体回收与繁殖91

第四节 提取噬菌体DNA93

第十章 提取真核生物基因组DNA与构建基因组文库95

第一节 SDS/酚法提取基因组DNA96

第二节 试剂盒法提取基因组DNA98

第三节 CTAB法提取基因组DNA100

第四节 构建基因组DNA文库101

第十一章 PCR基本操作103

第一节 PCR基本原理103

第二节 引物设计104

第三节 耐热DNA聚合酶106

第四节 PCR仪109

第五节 PCR基本操作110

第六节 PCR实例113

第七节 预防污染114

第八节 热启动115

第十二章 DNA重组119

第一节 重组流程119

第二节 插入DNA的准备120

第三节 载体的准备120

第五节 插入DNA的修饰与改造123

第四节 连接123

第六节 转化132

第七节 重组子筛选133

第十三章 探针制备137

第一节 探针标记法137

第二节 随机引物法138

第三节 末端标记法139

第四节 探针纯化143

第二节 PCR产物的纯化146

第十四章 PCR产物克隆146

第一节 PCR产物重组策略146

第三节 末端平齐147

第四节 TA克隆149

第五节 添加限制性内切核酸酶识别序列151

第十五章 PCR应用154

第一节 菌落PCR154

第二节 简并引物PCR156

第一节 DNA酶切158

第十六章 Southern印迹158

第二节 琼脂糖凝胶电泳159

第三节 变性、转膜与固定161

第四节 杂交165

第十七章 分子标记170

第一节 微卫星标记170

第二节 RFLP与RAPD172

第十八章 DNA序列测定与比对176

第一节 测序原理176

第二节 自动测序仪177

第三节 DNA序列的同源比对180

第三篇 RNA篇188

第十九章 RNA提取188

第一节 RNA实验前的准备188

第二节 实验材料190

第三节 用AGPC法提取RNA195

第四节 用NP-40法提取RNA197

第五节 使用试剂盒提取RNA200

第二十章 纯化poly(A)+RNA203

第一节 利用oligo(dT)纯化poly(A)+mRNA204

第二节 用oligo(dT)·纤维素进行柱层析206

第二十一章 构建cDNA文库210

第一节 以质粒为载体构建cDNA文库210

第二节 以λ噬菌体为载体构建cDNA文库215

第二十二章 RT-PCR222

第二十三章 RACE225

第一节 5′RACE225

第二节 3′RACE230

第一节 Northern印迹231

第二十四章 转录分析231

第二节 RNase保护分析235

第四篇 表达篇242

第二十五章 无细胞蛋白质合成242

第一节 概述242

第二节 大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统243

第三节 小麦胚芽无细胞蛋白质合成系统247

第一节 表达载体结构254

第二十六章 大肠杆菌表达系统254

第二节 表达中的问题256

第三节 表达实例与SDS-PAGE检测257

第二十七章 枯草杆菌表达系统261

第一节 菌株与载体261

第二节 转化261

第三节 蛋白质的提取263

第三节 转化264

第二节 放线菌培养264

第一节 菌株与载体264

第二十八章 放线菌表达系统264

第四节 蛋白质的提取265

第二十九章 酿酒酵母表达系统267

第一节 酿酒酵母表达系统概述267

第二节 外源基因在酿酒酵母表达系统中的表达269

第三十章 毕赤酵母表达系统274

第一节 宿主274

第二节 重组274

第三节 重组基因的表达279

第五篇 附录284

附录一 储液配制284

附录二 核酸及蛋白质数据291

附录三 各种识别位点的限制性内切核酸酶分类表294

附录四 部分限制性内切核酸酶需要的保护碱基295

附录五 筛选重组子用的平板标签贴纸(φ=9cm)296

附录六 常用DNA相对分子质量标准物的琼脂糖凝胶电泳图像示意图297

附录七 本书作为教材的使用方法298

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