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第1章 一般检查1

第一节 尿液一般检查1

一、标本的收集与保存1

上篇 实验诊断1

二、理学检查2

三、化学检查3

四、显微镜检查7

五、尿沉渣定量检查8

第二节 非蛋白氮类化合物检查9

一、血清（尿）尿素测定9

二、血清（尿）肌酐测定10

三、血清（尿）尿酸测定12

一、皮质醇测定13

第三节 肾上腺皮质激素测定13

二、血浆皮质酮测定16

三、醛固酮测定16

四、尿17－酮类固醇测定17

五、尿17－羟皮质类固醇测定18

六、儿茶酚胺类激素测定20

第2章 尿液脱落细胞和红细胞形态检查25

第一节 脱落细胞检查25

第二节 红细胞形态检查26

第3章 尿液病原微生物检查28

一、细菌的定性检查28

二、细菌的定量检查29

第一节 肾小球功能检查30

一、内生肌酐清除率测定30

第4章 肾功能检查30

二、菊粉清除率测定31

三、血肌酐测定32

四、尿肌酐测定32

五、指甲肌酐测定33

六、头发肌酐测定33

七、血清α1－微球蛋白测定34

八、血清β2－微球蛋白测定35

九、肾小球滤过分数37

第二节 肾血流量测定37

第三节 肾小管功能检查法38

一、近端肾小管功能试验38

二、远端肾小管功能测定39

二、碳酸氢根重吸收排泄试验42

第四节 肾小管酸中毒诊断试验42

一、氯化铵负荷试验42

第5章 肾脏免疫学检查44

第一节 血清生化检查44

一、总蛋白测定44

二、白蛋白和球蛋白测定45

三、蛋白电泳测定46

四、免疫球蛋白测定47

五、免疫球蛋白D测定49

六、免疫球蛋白E测定49

七、循环免疫复合物测定50

八、抗链球菌溶血素O测定52

九、C－反应蛋白测定53

一、血浆纤维蛋白原含量测定54

第二节 凝血功能检查54

三、血FDP测定56

二、血浆D-二聚体测定56

四、纤溶酶原测定57

五、纤溶酶测定58

六、组织型纤溶酶原激活物59

第三节 血清补体测定60

一、总补体溶血活性测定60

二、补体3测定62

三、补体4测定64

四、补体Clq定量测定65

五、补体3肾炎因子测定67

第四节 内分泌学检查68

一、血管紧张素Ⅱ活性测定68

六、血清补体4肾炎因子测定68

二、血清维生素D3的测定70

三、红细胞生成素测定71

第五节 血清抗体测定72

一、抗核抗体测定72

二、抗双链DNA抗体测定73

三、抗可提取抗原抗体测定74

四、抗心磷脂抗体测定75

五、抗肾小球基底膜抗体测定76

六、抗肾小管基底膜（TBM）抗体测定78

七、抗Tamm-Horsfall蛋白抗体测定78

八、抗中性粒细胞细胞浆自身抗体测定79

九、皮肤狼疮带试验80

一、尿蛋白定性检查81

第六节 尿蛋白与蛋白组分检查81

二、尿本周蛋白定性检查83

三、尿液乳糜试验84

四、尿蛋白定量检查85

五、尿蛋白十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳87

六、选择性蛋白尿分析88

第七节 尿酶学测定88

一、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）测定88

二、乳酸脱氢酶同工酶（LDH）测定90

三、尿丙氨酸氨肽酶（AAP）测定91

四、γ－谷氨酰转肽酶（γ-GT）测定92

五、尿液溶菌酶测定93

一、微量白蛋白测定94

第八节 肾损伤的早期标志物检测94

二、α1－微球蛋白测定96

三、转铁蛋白测定97

四、尿β2－微球蛋白测定97

五、尿视黄醇结合蛋白（RBP）测定98

六、尿蛋白－1（UP-1）测定99

第九节 尿液特殊蛋白的检测100

一、Ⅳ型胶原测定100

二、转化生长因子β测定101

三、纤维蛋白（原）降解产物检查102

四、TH蛋白包裹游离细胞检测104

第十节 尿路感染相关检查104

二、尿抗体包裹细菌试验105

一、尿IgA测定105

三、尿亚硝酸盐测定106

四、氯化三苯四氮唑还原试验106

第6章 肾脏病理学检查109

一、标本的处理109

二、标本的制备109

三、光镜染色110

四、免疫荧光染色112

五、透射电子显微镜技术112

第7章 泌尿系结石的分析方法114

第一节 化学定性分析114

第二节 化学定量分析118

第三节 物理分析119

一、结石晶体基质结构120

二、结石晶体结构121

第8章 肾移植的组织配型124

第一节 概述124

一、组织配型的意义124

二、主要组织相容性复合物简介124

三、HLA特异性125

四、肾移植HLA配型策略126

五、抗HLA抗体的筛选意义128

六、常用试剂的配备128

第二节 淋巴细胞分离技术129

一、密度梯度分离法129

第三节 HLA抗体筛选技术130

四、从脾脏和淋巴结分离淋巴细胞130

二、淋巴细胞分离剂方法130

三、免疫磁珠分离剂法130

一、淋巴细胞毒交叉配合试验131

二、莱姆德细胞板方法132

三、莱姆德混合抗原（LATM）检测方法132

四、莱姆德抗原板（LAT）检测方法133

五、酶联STAT方法134

第四节 HLA血清学分型技术134

一、标准血清学分型134

二、单克隆抗体分型136

二、聚合酶链构象多态性分析137

三、DNA序列测定137

一、限制性片段长度多态性分析137

第五节 HLA的DNA分型技术137

四、聚合酶链反应寡核苷酸探针杂交138

五、顺序特异性引物聚合酶链反应技术139

第六节 HLA细胞学分型技术140

一、混合淋巴细胞培养140

二、纯合子细胞分型140

三、预处理淋巴细胞分型141

第9章 移植患者血药浓度检测142

第一节 环孢菌素A测定142

一、反相高效液相色谱法142

二、高效毛细管电泳法143

第二节 FK506测定144

第10章 血液特殊抗原检测146

第一节 前列腺特异抗原检测146

一、ELISA法147

第二节 甲胎蛋白检测147

二、RIA法148

第三节 绒毛膜促性腺激素测定149

第11章 精液与精子检查151

一、精液标本的采集和运送151

二、精液一般检查151

三、精液显微镜检查153

四、精子顶体染色及其形态学检查154

五、非精子细胞检查155

六、白细胞检查156

七、凋亡细胞检查156

八、细胞凋亡的研究方法158

二、Makler精子计数板161

一、血细胞计数板161

第12章 精液参数分析方法161

三、Microcell计数池162

四、计算机辅助精液分析162

第13章 精子功能指标测定164

第一节 精子膜功能测定164

一、精子尾部低渗肿胀试验164

二、伊红Y水试验164

第二节 精子核功能测定165

一、精子核DNA荧光染色165

二、精子核蛋白组分测定166

第三节 精子－仓鼠卵穿透试验167

二、精子－宫颈黏液玻片穿透试验168

一、精子毛细管穿透试验168

第四节 精子和宫颈黏液相互作用168

三、性交后试验169

第五节 精子线粒体功能测定170

一、NBT法171

二、精子线粒体DNA检测171

第14章 不育症相关抗体检查173

第一节 抗精子抗体173

一、混合抗球蛋白反应试验173

二、酶联免疫吸附法174

三、试管、玻片凝集试验174

五、免疫珠结合试验175

六、固相酶染色法175

四、混合细胞凝集反应175

七、间接荧光抗体试验176

八、补体依赖法176

第二节 抗透明带抗体176

一、间接荧光法176

二、ELISA法177

第三节 其他相关抗体177

一、子宫内膜抗体177

二、抗磷脂抗体178

三、抗卵巢抗体178

四、抗人绒毛膜促性腺激素抗体178

五、抗弓形虫抗体178

六、滋养细胞膜抗体178

二、单向免疫扩散法180

一、抗补体法180

第15章 精液免疫抑制物测定180

三、ELISA夹心法181

四、间接免疫荧光定位分析181

第16章 精液生化功能指标测定183

第一节 前列腺功能指标检查183

一、精浆酸性磷酸酶测定183

二、精浆柠檬酸测定184

第二节 精液果糖测定185

第三节 附睾功能指标测定186

一、PENG法α－葡萄糖苷酶测定186

二、精浆肉毒碱测定186

一、电泳分离染色法187

第四节 精液乳酸脱氢酶－X同工酶活性测定187

二、比色法188

第五节 精液顶体酶活力测定189

一、BAEE水解法189

二、明胶法189

三、精氨酸酰胺酶活性测定190

第17章 生殖系统微生物检查191

第一节 细菌与真菌检查191

一、普通细菌191

二、结核分枝杆菌191

三、杜克雷嗜血杆菌191

四、淋病奈瑟菌191

一、暗视野显微镜检192

第二节 梅毒螺旋体检测192

五、白色念珠菌192

二、血清学检测193

三、IgM抗体检测193

四、分子生物学检测193

第三节 人类免疫缺陷病毒（HIV）检测193

一、HIV抗体测定194

二、HIV核酸测定195

三、病毒载量测定195

四、p24抗原测定196

五、HIV细胞培养196

第四节 人类乳头瘤病毒（HPV）检测196

二、血清学检查197

一、刮片检查197

第五节 衣原体检测197

三、直接免疫荧光检查198

四、培养法198

第六节 支原体检测198

一、解脲支原体和人型支原体培养分离及药敏试验199

二、细胞培养支原体感染200

第七节 其他检查200

一、单纯疱疹病毒检查200

二、巨细胞病毒的检查201

三、风疹病毒检查201

下篇 研究方法203

第18章 研究文献的利用203

第一节 医学文献203

一、中文医学文献检索工具204

第二节 医学文献检索工具204

二、外文医学文献检索工具205

三、光盘检索工具206

第三节 互联网的应用207

一、免费MEDLINE检索207

二、Medical Matrix（医源）207

三、Medical World Search（MWS医学世界检索）207

四、HealthAtoZ207

五、MedSite208

六、其他208

二、确定科研方向的客观依据212

一、确定科研方向的意义212

第一节 科研方向的确定212

第19章 科研选题与研究思路212

第二节 科研课题的选择213

第三节 科研课题的设计214

一、申请科研基金214

二、课题设计原则214

三、课题设计的审定215

第四节 研究的哲学215

第20章 常用试验方法217

第一节 电子显微镜技术217

一、基本原理217

二、优点及适用范围218

三、标准化电镜样品固定和包埋程序218

四、应用进展219

五、其他新型显微镜技术221

第二节 免疫组织化学技术223

一、概述223

二、过氧化物酶－抗过氧化物酶（PAP）技术224

三、卵白素－生物素复合物（ABC）技术225

四、S-P法225

五、质量控制226

六、临床意义227

第三节 细胞培养技术228

一、培养环境228

二、细胞培养设施和基本条件229

三、培养细胞的形态229

四、培养用品的清洗与消毒230

五、肿瘤细胞的培养231

第四节 计算机图像分析232

一、基本原理和系统构成233

二、图像分析仪工作程序233

三、主要用途234

第五节 DNA提取技术239

一、从组织中提取239

二、从培养物中提取240

三、单链质粒DNA的小量制备241

四、从琼脂糖凝胶上分离DNA片段241

五、从琼脂糖凝胶上洗脱DNA片段242

第六节 自由基研究技术242

一、超氧阴离子自由基（？）测定242

二、羟自由基测定243

三、H2O2的酚红氧化测定法243

五、SOD活性测定244

四、脂过氧化物荧光测定244

六、过氧化氢酶（CAT）测定245

七、谷胱甘肽氧化物酶测定245

八、黄嘌呤氧化酶测定246

九、化学发光法简介246

十、自旋捕捉技术247

十一、自由基产生系统247

第七节 RNA提取技术247

一、从悬浮或贴壁细胞中提取RNA247

二、从大肠杆菌中分离RNA248

三、用寡聚（dT）纤维素分多聚（A）+RNA249

第八节 PCR技术249

四、底物（脱氧核糖核苷三磷酸，dNTPs）浓度250

五、PCR反应的酶及其浓度250

一、PCR反应的成分和作用250

三、TaqDNA聚合酶的活性250

二、PCR反应的缓冲液250

六、引物251

七、PCR反应条件的选择251

八、PCR反应的引物设计251

九、耐热DNA聚合酶252

第九节 Western blot技术252

第十节 Southern blot技术253

一、固相支持物的选择253

二、印迹方法254

三、放射性核素探针杂交258

第十一节 Northern blot技术259

一、RNA变性电泳260

二、RNA转印技术261

第十二节 转基因技术263

一、基因转染技术263

二、转基因动物技术265

第十三节 基因芯片技术266

一、基本概念266

二、基因芯片的种类及方阵构建267

三、样品的制备与标记269

四、杂交反应269

五、杂交信号检测270

六、在医学上的应用270

七、展望273

一、原理及技术要点274

第十四节 酶联免疫吸附技术274

二、常用方法275

三、泌尿外科应用举例276

第十五节 原位杂交技术277

一、基本技术277

二、新技术发展278

三、在研究中的应用280

第十六节 受体配体结合试验280

一、受体的概念280

二、受体研究方法281

三、受体－配基结合试验技术原则281

第十七节 流式细胞术282

二、抗利尿药290

一、利尿药290

第21章 药物药理学研究方法290

三、抗肾炎药291

四、抗肾病药292

五、抗急性肾衰药292

六、抗慢性肾衰药293

七、抗结石药293

八、抗前列腺增生药294

九、抗肿瘤细胞毒药295

十、抗肿瘤生物反应调节药296

十一、生殖毒性试验297

第22章 资料统计与论文撰写299

第一节 资料的统计整理299

一、基本概念300

第二节 常用的统计概念与指标300

二、常用统计指标302

第三节 假设检验303

一、计量资料的假设检验304

二、计数资料的假设检验308

三、等级资料的假设检验311

第四节 关系的确定312

一、计量资料两指标或两变量间的关系313

二、列联表资料两种属性的关联316

三、属等级资料的两有序变量间的相关关系316

四、秩相关317

第五节 多元统计分析317

二、表达方法320

一、合理处理实验或观察资料320

第六节 医学论文的撰写320

三、全文撰写321

第23章 实验动物与医学研究325

第一节 遗传学分类与常用实验动物325

一、遗传学分类325

二、常用实验动物325

第二节 实验动物的病原控制和质量监测328

一、病原控制328

二、质量监测329

第三节 动物实验的主要技术332

一、抓取和固定方法332

二、编号标记方法333

三、去被毛方法334

四、给药途径和方法335

五、体液、骨髓的采集338

六、处死方法341

附录A 实验动物相关指标343

附录B 常用缓冲液的配制347

一、磷酸缓冲液347

二、电泳缓冲液347

三、凝胶加样缓冲液348

四、Tris缓冲液348

五、常用缓冲液349

六、常用贮存液的配制349

附录C 精液分析基本指标正常参考值354

附录D 尿液检查参考值355

附录E 离心转速与相对离心力（g）的换算360