图书介绍
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- （美）戴维斯（Davis，L.G.）等著；张 钰等译 著
- 出版社： 上海：复旦大学出版社
- ISBN：7309001796
- 出版时间：1989
- 标注页数：395页
- 文件大小：12MB
- 文件页数：408页
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图书目录
译者的话1
1．分子生物学基础1
前言3
致谢4
2．分子生物学家的工具5
3．使用本手册的准备工作、步骤和注意事项10
3-1 本手册的使用10
3-2 应注意的安全问题14
3-3 分子生物学研究所需的仪器设备16
4．克隆载体与细菌细胞19
4-1 pBR32219
4-2 M1321
4-3 pUC24
4-4 λgt1026
4-5 λgt1128
4-6 EMBL 3和EMBL 430
4-7 Charon 2831
4-8 细菌菌株33
5．从真核细胞中制备DNA34
5-1 快速制备DNA34
5-2 从真核细胞中制备DNA的常用方法37
5-3 从培养细胞和组织中制备DNA40
5-4 限制性内切酶及其使用44
5-5 琼脂糖凝胶电泳51
5-6 Southern印迹55
6．用标记的合成探针检测核酸59
6-1 制作DNA合成探针：一般描述59
6-2 合成探针的末端标记63
6-3 用(32)P末端标记的合成探针作杂交66
7-1 切口平移70
7．用来源子质粒的探针探测核酸70
7-2 DNA杂交(Southern印迹杂交)74
8．质粒DNA制备78
8-1 细菌转化78
8-2 质粒DNA制备：Triton-溶菌酶法81
8-3 大量提取的碱裂法：质粒纯化88
8-4 质粒的“小量制备”法92
9．DNA限制酶切片段的制备95
9-1 小凝胶95
9-2 酶切后分析DNA限制酶切片段：琼脂糖凝胶电泳98
9-3 电泳洗脱101
9-4 DNA限制酶切片段的聚丙烯酰胺凝胶电泳104
10-1 精胺纯化DNA108
10．纯化DNA108
10-2 玻璃粉末洗脱DNA111
10-3 DNA纯化的其他方法114
11．真核细胞RNA的制备和分析117
11-1 异硫氰酸胍制备总RNA117
11-2 RNA的制备：微量法124
11-3 用寡聚脱氧胸苷纤维素选择Poly(A~+)RNA127
11-4 甲醛凝胶电泳分离RNA和Northern印迹131
11-5 标记探针和DNA或RNA样品的点渍印迹杂交135
11-6 RNA凝胶印迹探测：概述138
11-7 从克隆在质粒中的DNA制备RNA探针140
12．制备噬菌体克隆DNA145
12-1 噬菌体的生长和制备145
12-2 噬菌体DNA的大量制备和纯化149
13-1 克隆真核生物基因组DNA：导论154
13．克隆真核生物基因组DNA154
13-2 基因组DNA的制备：Mbo I部分酶解法156
13-3 制备基因组克隆化用的噬菌体载体160
13-4 基因组DNA与噬菌体臂连接和包装以构建文库165
13-5 包装的文库效价测定及涂平板培养167
13-6 用放射性标记探针筛选已倒平板的文库170
13-7 文库扩增176
14．cDNA克隆进λgt10和λgt11178
14-1 cDNA克隆载体λgt10和λgt11的制备178
14-2 从真核生物mRNA生成cDNA插入片段184
14-3 cDNA文库用λgt10或λgt11的臂连接并加以包装194
14-4 已包装的含插入片段的λgt10和λgt11倒平板和筛选197
14-5 从λgt10和λgt11cDNA克隆制备DNA203
15-1 用质粒作亚克隆：总则207
15．用质粒作亚克隆207
15-2 制备pBR322质粒以供亚克隆和与插入片段连接209
15-3 pBR322菌落杂交215
15-4 亚克隆在pUC质粒上218
16．M13克隆和顺序测定221
16-1 M13克隆和顺序测定：总则221
16-2 制备供克隆化的专一限制酶切片段227
16-3 BAL31核酸外切酶连续缺失法制备供M13克隆比的插入片段231
16-4 M13载体的制备和插入片段与载体的连接236
16-5 M13对JM103大肠杆菌宿主的转化240
16-6 用放射性标记探针筛选M13克隆选出待测顺序的插入片段243
16-9 制备作顺序分析用的单链M13DNA245
16-8 M13克隆的单行筛选分析248
16-9 聚丙烯酰胺顺序分析凝胶的制备252
16-10 M13克隆的顺序分析256
17-1 S_1核酸酶保护测定263
17．克隆DNA的进一步鉴定263
18．转染离体培养的哺乳动物细胞273
18-1 用纯化的质粒进行粘着细胞和非粘着细胞的磷酸钙转染273
18-2 非粘着和粘着哺乳动物细胞的DEAE葡聚糖介导的转染277
18-3 电穿孔280
18-4 选择转染的哺乳动物细胞：G418法283
18-5 氯霉素乙酰转移酶(CAT)分析285
19．蛋白质方法288
19-1 体外翻译和免疫沉淀288
19-2 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质292
19-3 Western印迹分析297
19-4 用于蛋白质或RNA的银染凝胶301
20．常用方法305
20-1 DNA/RNA的抽提和沉淀305
20-2 塑料袋的封口309
20-3 光密度的分析测定312
20-4 凝胶拍照或放射自显影314
20-5 放射自显影316
20-6 制作细菌生长的平板318
20-7 噬菌体的效价测定和涂布321
21．专用方法323
21-1 转基因小鼠的制备323
21-2 单克隆抗体的产生：杂交瘤融合332
21-3 用标记探针对组织切片作原位杂交340
21-4 酵母菌为受体的克隆化345
附录Ⅰ 贮存溶液348
附录Ⅱ 酶356
附录Ⅲ 试剂和仪器供应商358
索引363